cGAS及cGAS-STING通路：
cGAS-STING信號通路最初是作為天然免疫系統的一個重要組成部分被發現，其功能是檢測胞漿DNA的存在，并在反應中觸發炎癥基因的表達。DNA通常存在于細胞核中，異常在胞漿中定位的DNA與腫瘤的發生或病毒感染有關，環狀GMP-AMP合成酶(cyclic GMP-AMP Synthasec，cGAS)感知到本不應出現在細胞質的DNA時，會催化GTP和ATP之間發生化學反應并生成一種被稱為環鳥腺苷酸(cvclic GMP-AMP cGAMP)的小分子，該小分子作為先天免疫系統的信使，會進一步激活免疫反應。因比，cGAS就像一個防盜報警器，cGAMP則是防盜報警器產生的電信號。cGAMP結合并激活STING，后者是一種作為細胞對異常胞漿DNA作出免疫應答的關鍵組分的跨膜接頭蛋白，STING被激活后隨TBK1從內質網一起轉位至核周內體。TBK1激酶磷酸化并激活干擾素調節因子(IRFs)和NF-KB，后者誘導Ⅰ型干擾素和其他免疫應答基因。
2013年發現cGAS后不久，自我DNA的異常激活被證明是導致衰弱甚至致命的自身免疫性疾病的基礎，如系統性紅斑狼瘡（SLE）和Aicardi–Goutieres綜合征（AGS）。動物模型中的敲除研究清楚地表明，抑制cGAS是一種有希望的治療干預方法，使得cGAS成為近些年熱門的先天免疫靶點的酶。這里給大家帶來全球領先先導藥物高通量篩選專家BellBrook研發的cGAS抑制劑高通量篩選工具——Transcreener cGAMP cGAS檢測試劑盒，可助力全球制藥和生物技術公司、CRO和學術實驗室加速藥物發現。
Transcreener cGAMP cGAS檢測法通過測定生成的cGAMP來測定cGAS酶的活性。通過檢測cGAMP輸出，該方法提供了一種實時評估任何cGAMP產生酶活性的通用方法。Transcreener cGAMP檢測技術使用了一種簡單但高效的方法，包括cGAMP特異性抗體搭配遠紅熒光的示蹤劑。反應中產生的cGAMP與示蹤劑競爭，改變熒光特性并提供熒光讀出。cGAS分析可用于熒光偏振(FP)和時間分辨-熒光共振能量轉移(TR-FRET)兩種方式進行檢測~
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| 熒光偏振(FP)法原理示意圖 |
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| 時間分辨-熒光共振能量轉移(TR-FRET)法示意圖 |
參考用途：
- cGAS酶活性檢測
- 篩選cGAS抑制劑化合物庫
- 量化抑制劑效力
- 確定cGAS-抑制劑滯留時間
相關實驗驗證數據請參見：
Targeting the cGAS-STING Pathway Using a Homogenous, HTS Compatible Transcreener? cGAS Assay
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| 操作簡便，高通量，兼容96, 384和1536孔模式~ |
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| 出色的信號穩定性：24小時以上的信號依舊穩定性 |
產品性能展示：
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| cGAS由雙鏈DNA激活，需要ATP和GTP底物來生產cGAMP | cGAS和?cGAMP?線性 |
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| 第一步輕松高通量篩選處化合物庫 | 后續通過劑量反應確定抑制劑效力 |
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| cGAS被dsDNA激活 | ATP和GTP依賴 |
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Transcreener cGAMP cGAS試劑盒組分：
| 組分 | 描述 |
| cGAMP Antibody | 二核苷酸cGAMP特異的抗體。 |
| Tracer | 熒光的變化可以在FP或TR-FRET中讀取 |
| Stop & Detect Buffer B, 10X | 一種可以用來終止酶反應的緩沖液，用于終點法讀數 |
| ATP | ATP可用于酶反應和標準曲線 |
| GTP | GTP可用于酶反應和標準曲線 |
| cGAMP | 標準品 |
| Interferon Stimulatory DNA | ISD是一種45-bp的低聚物，用于激活cGAS酶 |
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需要自備的試劑及儀器：
| 名稱 | 描述 |
| cGAS酶 | cGAS（Cat# 2227）可以從艾美捷購買。 |
| 酶緩沖液 | 我們通常使用含有20 mM TRIS (pH 7.5)， 5 mM MgCl2, 0.01% Brij-35和1% DMSO(測試化合物的溶劑)的酶緩沖液，使用最適合你的酶條件的緩沖液。 |
| 檢測用板子 | FP?格式：黑色板子，推薦康寧384孔板（Cat# 4514） TR-FRET格式：白色板子，推薦康寧384孔板(Cat #4513) 均可從艾美捷購買~ |
| 讀板器 | 需要能檢測熒光偏振或者TR-FRET的讀板器 |
| 移液器 | 使用液體處理設備，可以精確分配亞微升體積到384孔板。 |
| 超純水 | 一些去離子水系統被核酸酶污染，核酸酶可以降解核苷酸底物和產物，降低了檢測性能。小心處理和使用超純水可以消除這個潛在的問題 |
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相關產品推薦：
| 類別 | 貨號 | 名稱 | 規格 |
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| 3024-10K | Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (10,000 Assay, 384 Well) | 10000 Assay | |
| 3024-100K | Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well) | 10X10000 Assay | |
| TR-FRET法的試劑盒 | 3025-1K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (1,000 Assay, 384 Well) | 1000 Assay |
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| 3025-100K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well) | 10X10000 Assay | |
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| 2228 | Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human,?Full-Length,?100 μg | 100 μg | |
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| 3024-1K-B | Includes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 μg Human cGAS Enzyme | 1000 Assay+20 μg | |
| 黑色板子 | 2233 | Corning 96-Well Black Assay Plates (#3686), 3-Pack (200+ Assays) | 3-Pack |
| 2229 | Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 3-Pack (1,000+ Assays) | 3-Pack | |
| 2230 | Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 30-Pack (10,000+ Assays) | 30-Pack | |
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| 2231 | Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 3-Pack (1,000+ Assays) | 3-Pack | |
| 2232 | Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 30-Pack (10,000+ Assays) | 30-Pack |
Note：以上產品僅用于科研，不能用于醫療及診斷~
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來源：cGAS-STING通路新助力——高通量cGAS抑制劑篩選（試劑盒）工具
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